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重组蛋白纯化方法

日期:2014-09-28 00:00:00

狭义来讲,提取指制备物与细胞固体成分或其它结合成分的分离,由固相转入液相或从细胞内生理状态转入外界特定溶液环境的过程,即分离前期被提取物从破碎的细胞中释放出来的过程。如果被提取物程固相或与固体结合,提取时由固相转入液相,常称为固液萃取;如果被提取物已经呈液相存在,提取时由一液相转入转入另一互不相溶的液相,这种方法称为液液萃取。

 

广义来讲,提取又可称为抽提或萃取,贯穿在整个分离纯化过程中,如核酸制备中用氯仿或苯酚反复抽提除去蛋白质,分离DNARNA。  提取的好坏受到多种因素的影响,包括:

1)溶液 涉及到溶液中的保护成分、离子强度、PH值、温度、表面活性剂、变性剂(如尿素和盐酸胍)和粘稠度、溶液的更换; 

2)材料 包括材料本身固有的特性、材料的选择和处理;

3)目的分子 目的分子的理化性质、存在方式和部位、含量;

4)其它因素 搅拌、提取时间的长短. 

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